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用純水短時間內(nei) 衝(chong) 洗色譜柱,通常不會(hui) 對色譜柱造成較大的損傷(shang) ,但如果長時間用水衝(chong) 洗色譜柱則可能引起固定相流失和相塌陷現象,
所以若非必要請盡量避免用純水衝(chong) 洗色譜柱。
建議在水中加入一定量的甲醇或乙腈進行衝(chong) 洗,通常水的含量<90%不會(hui) 對色譜柱造成任何影響。
原因分析:
首先,由於(yu) 目前所用的色譜柱大多以矽膠為(wei) 基質,矽膠的溶解特點是在純水中的溶解度比在含有一定濃度有機溶劑的流動相中要大得多,
所以長時間的用純水衝(chong) 洗會(hui) 導致固定相的流失,引起柱效下降。
其次,對於(yu) 常規的 C18 柱而言,由於(yu) C18 長鏈與(yu) 水是不互溶的,C18 長鏈之間的相互作用力大於(yu) C18 與(yu) 水分子的作用力,長時間的用水衝(chong) 洗,
使得C18 長鏈之間相互靠近,水流的衝(chong) 刷,導致相互聯結的C18 長鏈倒伏在矽膠基質的表麵,對疏水性物質的保留能力下降,即相塌陷。
有些廠家推出了適於(yu) 做離子色譜柱衝(chong) 洗的純水柱,這種純水柱可以用純水作流動相而不會(hui) 產(chan) 生相塌陷,這對隻溶於(yu) 純水的樣品的分析提供了一個(ge)
很好的選擇。
第三,如使用過含緩衝(chong) 鹽的流動相的色譜柱,用純水衝(chong) 洗,並一定能將緩衝(chong) 鹽*洗去。
因為(wei) ,由於(yu) 緩衝(chong) 鹽難溶於(yu) 有機溶劑,C18 反相柱中用的填料是在矽膠表麵上接上許許多多的C18 長鏈,相當於(yu) 一個(ge) 疏水的有機相,而矽膠基體(ti)
被有機物質包裹著,所以用純緩衝(chong) 鹽水溶液做流動相時也許緩衝(chong) 鹽不容易到達矽膠基質,不至損害基體(ti) 。但所用的流動相通常會(hui) 含一部分有機
溶劑,而且這些有機溶劑與(yu) C18長鏈是互溶的,因此有機溶劑的加入增強了流動相滲入矽膠基質的能力,能使部分緩衝(chong) 鹽達到矽膠基質。
同樣的道理,用純水衝(chong) 洗隻能洗掉表麵的緩衝(chong) 鹽,而滲入深處的緩衝(chong) 鹽則仍然殘留在那裏。所以在水中加入部分有機溶劑進行衝(chong) 洗,一般的C18
柱通常用含水20%~90%都可以,含水的比例要視分析時使用的流動相來定,原則上,用於(yu) 衝(chong) 洗的流動相中水的比例應該等於(yu) 或高於(yu) (緩衝(chong) 鹽用後清
洗的情況,推薦使用“等於(yu) ”)分析時所用流動相中水的比例。
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水平至1-3ppb,*離子色譜等分析儀(yi) 器對超純水TOC的要求。